O “Novo Programa de Tratamento de Diagnóstico e Vírus do Vírus Coronário (Nona Edição do Trial)” usa o valor da CT de detecção de ácido nucleico ≥35 como uma das bases importantes para a liberação do gerenciamento ou descarga de isolamento. Então, o que representa o valor da TC do kit de detecção de ácido nucleico? Os valores de TC de diferentes kits são comparáveis? Quanto menor o valor da TC, melhor o desempenho do kit?
O valor da TC (ciclo limite, CT) é o número de ciclos de PCR quando a intensidade do sinal de fluorescência quantitativa de fluorescência real - Tempo excede o limite de conjunto. Os kits de detecção de ácido nucleico tomam a nova coroa como exemplo. Para a mesma reação do mesmo kit para detectar duas amostras de vírus - Quanto menor a TC da amostra B, maior a carga viral. O valor da TC é inversamente proporcional à carga viral e sua infectividade. Os prós e os contras de diferentes kits quantitativos de fluorescência real - Tempo não podem ser julgados apenas pelo tamanho do valor da TC, porque os valores de TC de diferentes kits não são comparáveis. A avaliação de desempenho do kit precisa ser medida a partir dos aspectos da sensibilidade (limite mínimo de detecção), especificidade, precisão, estabilidade e aplicação de diagnóstico. Cada fabricante de reagentes tem seus próprios dezoito tipos de artes marciais e eles têm seus próprios poderes mágicos na aplicação, por isso não vou entrar em detalhes aqui.
Para instrumentos/sistemas de análise quantitativos de PCR (qPCR) convencionais - Com o desenvolvimento da indústria e o avanço da tecnologia, os equipamentos e reagentes de qPCR encontraram oportunidades e desafios. Yiou Think Tank (Relatório de pesquisa de 2021 sobre a indústria de testes genéticos da China: tecnologia) analisou que a maioria das empresas da indústria de qPCR do meu país está enfrentando problemas comuns com base na tecnologia. Em resposta a esses problemas, as soluções são divididas principalmente em dois tipos: acelerando a melhoria da tecnologia e implantando novas tecnologias.
O POCT para o diagnóstico molecular de qPCR é uma das direções de desenvolvimento da indústria, e a melhoria do desempenho é um fator importante para acelerar a aplicação da tecnologia. Para equipamentos POCT com taxa de transferência de amostra única de qPCR, como otimizar o valor da CT do parâmetro -chave de uma única reação em P&D? O mesmo equipamento, o mesmo sistema de reação e a mesma concentração de modelo, teoricamente, quanto maior o valor da CT de uma única reação, menor a eficiência da enzima na reação.
No processo de melhorar a eficiência da reação enzimática e otimizar o valor da TC, uma curva de amplificação quantitativa de fluorescência de 40 PCR típica pode ser analisada primeiro. A curva de amplificação na figura abaixo é dividida em fase de fundo de fluorescência, fase de amplificação exponencial, fase linear e fase de platô. Para atingir um fundo de fluorescência mais baixo, na medida do possível distingui -lo do valor de fluorescência da amplificação exponencial precoce, é necessário testar o portador de consumíveis da reação, a triagem do projeto da sonda de iniciadores e o sistema de tampão de reação. O período de amplificação exponencial é a reação mais direta da atividade enzimática e também é a prova da coordenação perfeita de equipamentos de POCT, portadores de reação e reagentes. Nesse momento, o controle de temperatura do equipamento, a aquisição e análise de sinais ópticos, a biocompatibilidade do portador e o desempenho do sistema dos reagentes precisam ser ajustados e testados em todos os aspectos. Finalmente, toda a amplificação é concluída e os resultados devem ser apresentados por um rigoroso algoritmo de dados para obter um valor de CT razoável.

Uma pequena etapa na otimização do valor da TC são as inúmeras etapas do pessoal de P&D. Na ansiedade e excitação do dia e da noite, toda vez que “as montanhas e rios não estão em lugar algum, os salgueiros estão escuros e as flores são brilhantes e há outra vila”, o que nos dá coragem e paixão para avançar novamente.